Gạo Nếp Gạo Tẻ kể về mối quan hệ cùng những biến cố trong cuộc sống của các thành viên trong gia đình bà Mai (NSND Hồng Vân) - ông Vương (Mai Huỳnh) – một gia đình tam đại đồng đường với ông bà, cha mẹ và con cái chung sống với nhau. Bà Mai đối xử khác biệt với hai cô con gái Hương (Lê Phương) và Hân (Thúy Ngân) như “gạo nếp gạo tẻ”. Cô con gái đầu Hương bị mẹ ghét vì nghèo và có con trước hôn nhân. Ngược lại, Hân - cô con gái thứ 2 là Top 10 hoa hậu VN, lại lấy chồng doanh nhân thành đạt, làm cho mẹ được “thơm lây”. Còn cô con gái thứ 3 là Minh (Phương Hằng) không chỉ làm trái ý mẹ: bỏ nghề y danh giá để làm biên kịch, mà còn nảy sinh tình cảm với anh chàng học vấn thấp, khiến bà Mai phiền lòng. Tuy mâu thuẫn căng thẳng đến mức có lúc mọi người trong nhà bà Mai tưởng như không thể nhìn mặt nhau, nhưng khi đối mặt với giông bão cuộc đời, mọi người lại tự động quay về bên nhau.